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      2. 新聞詳情

        ELISA過程中的洗板

        日期:2024-05-20 18:03
        瀏覽次數:163
        摘要: 洗板在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻是決定試驗成敗的關鍵。ELISA就是靠洗板來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的,通過洗板以清洗殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗板時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。在ELISA操作中,洗滌是主要的關鍵技術,應嚴格按要求洗滌。洗板如不徹底,有酶結合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標記抗體作用而產生干擾。 1.各廠家的洗液是根據各自試劑的條件配制的,因此采用不配套的洗液常會得到不正常的反應結果,包括本底升高,所以不同廠家的洗液不應混用。 2. 洗液應按規定的倍數稀釋使用。試劑盒提供的洗液是濃縮的,過多稀釋洗液,會影響洗液的效果,而使反應的本底升高。反之造成假陰性。 3. 稀釋洗液的水應該是新鮮的蒸餾水,電導率小于1.5us/cm。如果水中含有過多的鈣、鎂離子,這些離子會占用表面活性劑,使試驗本底增高。
        ELISA實驗原理簡單,步驟少,流程短,試劑盒操作相對簡便,實驗小白也能輕松上手。然而,實驗上手雖快,想要得到可靠的實驗結果,卻并不那么容易。
            洗板在ELISA過程中雖不是一個反應步驟,但卻是決定試驗成敗的關鍵。ELISA就是靠洗板來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的,通過洗板以清洗殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質,以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗板時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。在ELISA操作中,洗滌是主要的關鍵技術,應嚴格按要求洗滌。洗板如不徹底,有酶結合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標記抗體作用而產生干擾。
        1.各廠家的洗液是根據各自試劑的條件配制的,因此采用不配套的洗液常會得到不正常的反應結果,包括本底升高,所以不同廠家的洗液不應混用。
         2. 洗液應按規定的倍數稀釋使用。試劑盒提供的洗液是濃縮的,過多稀釋洗液,會影響洗液的效果,而使反應的本底升高。反之造成假陰性。
         3. 稀釋洗液的水應該是新鮮的蒸餾水,電導率小于1.5us/cm。如果水中含有過多的鈣、鎂離子,這些離子會占用表面活性劑,使試驗本底增高。
         上海通蔚生物科技有限公司擁有自己的實驗室,專業的技術研發團隊,提供各種生物試劑,細胞,血清,ELISA試劑盒的研發與銷售,實驗提供免費代測服務,并提供精湛的技術服務,如果您有實驗上的問題歡迎來咨詢,為您提供業的一對一技術指導。 
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