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      2. 文章詳情

        如何完善ELISA?

        日期:2024-05-16 10:37
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        摘要:1.選擇適合您需求的ELISA方法 ELISA可以通過多種方式進行配置,所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面,用抗體進行探測,并測量產生的信號。 穩健的洗滌技術是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優化洗滌步驟的數量、持續時間和體積,以及洗滌緩沖液的去污劑濃度,對于確保去除任何可能影響結果的未結合試劑至關重要。為了獲得更一致的ELISA數據。 2.注意標準曲線 標準曲線對于獲得定量ELISA結果至關重要,因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因,用于生產它的參考材料必須是高質量的,并且有足夠的數量,以在分析的整個生命周期內實現可重復的性能。 ELISA數據通常以相對于測定讀數的分析物濃度表示,可以是比色,熒光或化學發光。在標準曲線范圍內使用更多點(理想情況下為8個或更多)提供了消除異常值的靈活性,并在信號響應范圍內更好地定義曲線以改進擬合。 3.確??芍貜托院蜏蚀_性 可重復性和準確性對于任何免疫測定都是必不可少的,但當定量ELISA 數據用于推動關鍵決策時,要求可能特別嚴格。
        ELISA是一種免疫測定。免疫測定(immunoassay, IA) 是應用免疫學技術測定標本的方法。在檢驗中主要通過抗原抗體反應檢測體液中的抗體或抗原性物質。那么如何完善ELISA?
        1.選擇適合您需求的ELISA方法
        ELISA可以通過多種方式進行配置,所有這些方式都涉及在封閉前將抗原固定到微孔板表面,用抗體進行探測,并測量產生的信號。穩健的洗滌技術是減少ELISA中背景信號的有效方法之一。優化洗滌步驟的數量、持續時間和體積,以及洗滌緩沖液的去污劑濃度,對于確保去除任何可能影響結果的未結合試劑至關重要。為了獲得更一致的ELISA數據。
        2.注意標準曲線
        標準曲線對于獲得定量ELISA結果至關重要,因為它用于計算未知樣品的濃度。出于這個原因,用于生產它的參考材料必須是高質量的,并且有足夠的數量,以在分析的整個生命周期內實現可重復的性能。ELISA數據通常以相對于測定讀數的分析物濃度表示,可以是比色,熒光或化學發光。在標準曲線范圍內使用更多點(理想情況下為8個或更多)提供了消除異常值的靈活性,并在信號響應范圍內更好地定義曲線以改進擬合。
        3.確??芍貜托院蜏蚀_性
        可重復性和準確性對于任何免疫測定都是必不可少的,但當定量ELISA 數據用于推動關鍵決策時,要求可能特別嚴格。為了額外保證檢測間的重現性,添加另一個內部對照來補充標準曲線可提供更大的結果可信度。作為一般規則,重復讀數的變異系數 (CV) 不應超過 20%。
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